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倒置熒光顯微鏡的特點和使用
來源:技術文章    更新時間:2023-05-11    瀏覽:754次
倒置熒光顯微鏡,是指與一般顯微鏡相比,其物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過來,由熒光附件與顯微鏡有機結合構成的顯微鏡。激發光從物鏡向上落射到標本表面,被反射到物鏡中并聚集在樣品上,樣品所產生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發光同時進入物鏡,經雙色束分離器使激發光和熒光分開而成像。
 
倒置顯微鏡具有在培養瓶或培養皿內進行顯微觀察的特點;可以觀察不經染色的透明活體;落射熒光顯微適用于熒光顯微術。該儀器特別適用于對活體細胞和組織、流質、沉淀物等進行顯微研究,是生物學,細胞學,腫瘤學,遺傳學,免疫學等研究工作的理想儀器??晒┛蒲?、高校、醫療、防疫和農牧等部門使用。
 
倒置熒光顯微鏡的功能之一是熒光觀察,其基本原理是利用激發光激發樣本產生熒光,從而實現樣本的形狀與定位觀察,主要適用于熒光標記樣本的觀察。熒光觀察是倒置熒光顯微鏡的重要功能,其配件昂貴且使用特殊。要想醫學研究生正確地掌握熒光觀察的操作使用規范,教師除了教會他們掌握基本的操作方法,同時更為重要的是教會他們掌握它的特殊性。首先,在標本制作中,載玻片和蓋玻片應表面光潔且厚度適宜(載玻片在0.8mm~1.2mm之間,蓋玻片在0.17mm左右);標本應厚度適宜,同時避免細胞重疊或雜質掩蓋;封裱劑應使用甘油和碳酸鹽緩沖液(0.5mol/L PH9.0~9.5)的等量混合液。其次,在熒光觀察前,應關閉房間內的電燈和倒置熒光顯微鏡的白光,確保處于暗室環境。最后,在熒光觀察中,應嚴格控制觀察時間,一般以1~2小時/次為宜,否則熒光會出現衰減和消失的現象;調整光源時應佩戴防護眼鏡,避免紫外線對眼鏡的傷害。

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